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人主動脈內(nèi)皮細胞提取物說明書

人主動脈內(nèi)皮細胞提取物說明書

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人主動脈內(nèi)皮細胞提取物說明書 詳細資料

注意事項:
. 接收到人主動脈內(nèi)皮細胞提取物說明書,肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞00X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6.000rpm,5min離心,重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。 

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人主動脈內(nèi)皮細胞提取物說明書

Human Aorta: Normal Aortic Endothelial Cell Derivatives

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人主動脈內(nèi)皮細胞提取物【Human Aorta: Normal Aortic Endothelial Cell Derivatives】
     人主動脈內(nèi)皮細胞提取物說明書人主動脈內(nèi)皮細胞提取物是從人原代主動脈內(nèi)皮細胞提取的,人原代主動脈內(nèi)皮細胞從正常人主動脈內(nèi)皮組織制備。正常人主動脈內(nèi)皮組織采集自各地方醫(yī)院,采集工作根據(jù)IRB 和 HIPAA批準的方案進行。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。

總RNA制備:利用Qiagen RNeasy KitTrizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。        cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA*鏈,以50ul總反應(yīng)體系進行逆轉(zhuǎn)錄,體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機引物以及0mgRNA。68℃反應(yīng)0min 后終止RT反應(yīng)。利用x RT Buffer 運輸cDNA μl cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴格的QA/QC分析,保證產(chǎn)品的質(zhì)量。        蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mM Tris, pH7.2, 50mM NaCl, mM EDTA, mM EGTA, % NP-40 , mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人血管組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, % SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF-80度保存。        潛在的應(yīng)用: <>已知基因的PCR克??;<2>mRNA選擇性剪接;<3>基因克隆與目標測序;<4> Western and Northern Blot;<5>蛋白檢測與蛋白質(zhì)組學;<6>芯片研究與表達圖譜。?

FGF0 / KGF2 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 WB   IHC-P   IP   50 µg

Syntaxin 6 / STX6 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 WB    50 µg

CEACAM8 / CD66b / CD67 抗體 (FITC), 鼠單抗 FCM    25 Test

EpCAM / TROP- / TACSTD 抗體 (FITC), 鼠單抗 FCM    25 Test

RGMA 抗體, 兔多抗 ELISA    400 µg

CD208 / LAMP3 / DC-LAMP 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA   IHC-P    50 µg

OLR / LOX 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA    50 µg

ALDH7A 抗體, 兔單抗 FCM   IF   ICC/IF   50 µg

CD9 抗體 (PE), 鼠單抗 FCM    25 Test

CD20 / MS4A 抗體, 鼠單抗 IHC-P    50 µg

人主動脈內(nèi)皮細胞提取物說明書2,6-二甲硝分子式:5.6英文名稱:2,6- two:8-20-9分子量: C8H9NO2

3-溴呋喃分子式:46.97英文名稱:3- bromide:22037-28-分子量: C4H3BrO

效唑分子式:29.78英文名稱:Vinyl effect:83657-7-4分子量: C5H8ClN3O

2-溴-5-甲氧甲分子式:20.06英文名稱:2- methyl bromide -5-:27060-75-9分子量: C8H9BrO

,3,5-*氧-2-硝分子式:23.9英文名稱:,3,5- -2- nitrobenzene:4227-8-0分子量: C9HNO5

全染色劑英文名稱:Total coloring agent分子式:分子量::863827

2-氯-4-甲-3-硝吡分子式:72.57英文名稱:2- -4- -3- nitro pyridine:23056-39-5分子量: C6H5ClN2O2

6-甲氧喹哪分子式:73.22英文名稱:6-, which is:078-28-0分子量: CHNO

2--5-羥嘧分子式:.英文名稱:2- amino -5- hydroxy:43489-45-6分子量: C4H5N3O

環(huán)己甲醛英文名稱:Cyclic formaldehyde分子式:2.7分子量: C7H2O:2043-6-0

培養(yǎng)步驟:
人主動脈內(nèi)皮細胞提取物說明書對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按:2到:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按:2到:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按:2到:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 人主動脈內(nèi)皮細胞 Human Aorta: Normal
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