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B16-F10小鼠黑色素瘤細(xì)胞

B16-F10小鼠黑色素瘤細(xì)胞

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B16-F10小鼠黑色素瘤細(xì)胞正在出售的產(chǎn)品:人肺轉(zhuǎn)化細(xì)胞;AE1201 人肝竇內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基 人小膠質(zhì)細(xì)胞裂解物HML GP120 Others HIV 人類免疫缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 (group M, subtype CRF07_BC)人細(xì)胞裂解液 NCI-H838(人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞)

B16-F10小鼠黑色素瘤細(xì)胞 詳細(xì)資料

細(xì)胞處理:

B16-F10小鼠黑色素瘤細(xì)胞
1) 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇:

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶(或皿)中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況和細(xì)胞密度。

2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法:

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

2. 加入0.25%(w / v)-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘(難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長消化時間),然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。

3.輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力,后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。

3)細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實驗使用。

B16-F10小鼠黑色素瘤細(xì)胞

B16-F10小鼠黑色素瘤細(xì)胞


B16-F10小鼠黑色素瘤細(xì)胞

B16-F10小鼠黑色素瘤細(xì)胞

商品屬性

B16-F10小鼠黑色素瘤細(xì)胞

鑒定

STR鑒定正確

種屬

小鼠

生長特性

貼壁

細(xì)胞形態(tài)

梭形細(xì)胞樣;上皮樣細(xì)胞樣

規(guī)格

1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

分類

小鼠細(xì)胞系

 

商品介紹

B16-F10小鼠黑色素瘤細(xì)胞

生長特性 貼壁細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài) 梭形細(xì)胞樣;上皮樣細(xì)胞樣

凍存條件

凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度:液氮

培養(yǎng)方案A(默認(rèn))

生長培養(yǎng)基:

RPMI-164010% FBS1% P/S

培養(yǎng)條件:

氣相:空氣,95%CO2,5%, 溫度:37

推薦傳代比例 1:3-1:4

推薦換液頻率 2-3/

注意事項 B16系列細(xì)胞,使用DMEM培養(yǎng)時可能出現(xiàn)黑色素快速積累,細(xì)胞不增殖或死亡的情況,該細(xì)胞正常擴增凍存請使用RPMI-1640完培,若您需要進(jìn)行分泌黑色素等后續(xù)

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟:

B16-F10小鼠黑色素瘤細(xì)胞
(1)當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長密度達(dá)到90%時,進(jìn)行傳代。

(2)吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次,搖勻后棄掉。

(3)加入覆蓋瓶底量的且含有EDTA。

(4)培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化,3min左右拿出,用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量,發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落,加入2倍量的中止消化,并吹打均勻,避免消化過度。

(5)細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi),1000rpm/min離心3~5min。

(6)吸棄上清,加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞,吹打細(xì)胞使其均勻分散。

(7)吸棄細(xì)胞懸液,選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中,補充培養(yǎng)液并搖勻,放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。

(8)根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間。

(9)細(xì)胞凍存

B16-F10小鼠黑色素瘤細(xì)胞


細(xì)胞接收后的處理:

B16-F10小鼠黑色素瘤細(xì)胞
1)收到細(xì)胞后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染,請拍照后及時聯(lián)系我們。

2)請在4或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài),同時給剛收到的細(xì)胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時收到時細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。

3)貼壁細(xì)胞:細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況,有些貼壁細(xì)胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下,可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基(若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收,重懸打入到原培養(yǎng)瓶中),加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL,放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長密度達(dá)70%-80%以上,可以對細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中,若因運輸振動脫落的細(xì)胞需要離心回收。

公司正在出售的產(chǎn)品:
B16-F10小鼠黑色素瘤細(xì)胞

大鼠白介素2可溶性受體α鏈(sIL-2Rα/CD25)檢測試劑盒 ,英文名: sIL-2Rα/CD25 ELISA Kit

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ELISA 小鼠類胰島素生長因子-2(mouse IGF-2)  進(jìn)口分裝

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ELISAKitf-βCG大鼠游離β絨毛膜

NTRK2重組人 TrkB / NTRK2 蛋白 Protein

(F2)重組蛋白 Recombinant Coagulation Factor II (F2)

CGA重組人 FSH alpha / TSH alpha / CGA 蛋白 Protein

EPHA4 Protein Human 重組人 EphA4 蛋白

HA Protein H7N9 重組甲型流感 H7N9 (A/Anhui/1/2013) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白

(F2)重組蛋白 Recombinant Coagulation Factor II (F2)

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NTRK2重組人 TrkB / NTRK2 蛋白 Protein

HA Protein H7N9 重組甲型流感 H7N9 (A/Anhui/1/2013) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白

CGA重組人 FSH alpha / TSH alpha / CGA 蛋白 Protein

B16-F10小鼠黑色素瘤細(xì)胞小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP-9/Gelatinase B)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human neurotensin () ELISA Kit 人神經(jīng)降壓素()檢測試劑盒

Humanplateletbasicprotein,PBPELISAKit 人血小板堿性蛋白(PBP/CXCL7)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanai-hepatitisBviruseaibody,HBeAb檢測試劑盒人抗乙型肝病毒e抗體(HBeAb)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T

植物0脂酶D(PhospholipaseD)總活性比色法定量檢測試劑盒20

humanversican/PG-M/PG-350,VSELISAKit人多功能蛋白聚糖(VS)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T

小鼠白細(xì)胞介素25IL-25)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠白細(xì)胞活化黏附因子(ALCAM)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠白細(xì)胞分化抗原30(CD30)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠白三烯E4LTE4)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝


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